Estrategias de diagnóstico para detección del virus de diarrea viral bovina

Estrategia de diagnóstico para la detección del Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB) en animales Persistentemente Infectados (PI) mediante pruebas ELISA y PCR.

MVZ Mariana Serrano García
Soporte Técnico de Salud Animal
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El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) es una enfermedad de alta prevalencia en los bovinos de cualquier edad que afecta el sistema inmune del animal y lo hace vulnerable a infecciones que pueden generar trastornos de tipo reproductivo que se manifiestan principalmente en muertes embrionarias, abortos espontáneos, defectos congénitos, mortalidad neonatal y problemas de fertilidad, aunque tiene otras formas de manifestarse como gastroenteritis aguda y lesiones erosivas del tracto digestivo. Por otro lado, generalmente se encuentra asociada a otras patologías como neumonías, peritonitis relacionadas con otros agentes patógenos. Lo anterior provoca un importante impacto económico fuerte al productor(1, 5, 9, 10). El virus de la DVB pertenece al género Pestivirus dentro de la familia Flaviviridae. La comparación genómica de los virus de DVB ha dado como resultado el reconocimiento de dos genotipos: DVB 1 (asociado con la enfermedad clásica de DVB en sus diferentes manifestaciones clínicas) y DVB 2 (relacionado a cuadros agudos severos y hemorrágicos digestivos en animales adultos. También se ha aislado de animales PI y de suero fetal). Cada uno de estos genotipos ocurren como biotipos de acuerdo con su comportamiento en células de cultivo siendo citopáticos o no citopáticos(1, 4, 5, 8, 9).

En México, la DVB está ampliamente distribuida y diferentes estudios realizados reportan prevalencias que van de un 30 a un 85.0%(1, 3, 4, 5). Estos mismos rangos de prevalencia se han encontrado en hatos con o sin vacunación, como lo soporta un estudio de prevalencia de DVB realizado por el Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP) donde se determinaron las siguientes prevalencias para animales que nunca habían sido vacunados: Puebla de 31.1 a 51.4%, Tabasco de 49.7 a 54.6 y Veracruz de 76 a 76.2%(3). La principal forma de introducir el virus en un hato susceptible es a través de la adquisición de bovinos PI o hembras que transportan fetos PI. Otras vías de introducción son el uso de vacunas vivas (sobre todo en hembras gestantes en el periodo justo para generar un PI), semen contaminado, cohabitación con bovinos infectados, transferencia embrionaria y el contacto con bovinos con infección aguda(8).

La detección del virus de la DVB dentro del hato se realiza a partir de estrategias eficientes para la prevención y control de la enfermedad como son el diagnóstico oportuno, cuarentenas, segregación y eliminación de animales PI, adquisición de animales libres del virus, y seguimiento de programas de vacunación(9, 10).

MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO

Hoy en día, la técnica más utilizada para el diagnóstico de la enfermedad es mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)(4). En el mercado nacional se cuenta con dos formatos diferentes:

1) ELISA tipo sándwich, para detección de antígeno.
2) ELISA para detección de anticuerpos, del cual hay dos kits distintos:
a) ELISA indirecto para la detección de anticuerpos totales.
b) ELISA competitivo para la detección de anticuerpos contra la proteína no estructural P80 (NSP2-3). Esta prueba es capaz de detectar la infección activa de DVB aún si están vacunando, siempre y cuando la vacuna sea inactivada, ya que este tipo de vacunas no inducen la producción de anticuerpos anti-P80.

Figura 1. Patogenia de la enfermedad (1, 9).

Estrategias de diagnóstico para detección del virus de diarrea viral bovina VDVB 1

Otro método de análisis que está tomando fuerza es mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en tiempo real.

Esta prueba de biología molecular está enfocada a la detección de material genético. Con ella, es posible detectar una región específica del ARN del virus, con una sensibilidad tal que permite evidenciar casos positivos partiendo de una carga de menos de 10 copias del ARN. Es posible diferenciar animales infectados transitoriamente (TI) de los animales PI dependiendo del contenido de ARN presente en la muestra.

Tabla 1. Resultados esperados en pruebas de Laboratorio.

Estrategias de diagnóstico para detección del virus de diarrea viral bovina virus diarrea viral bovina 1

Una comparativa general del diagnóstico por PCR y ELISA se muestra en la tabla 1, mientras que en la figura 2 se representa un modelo de diagnóstico de DVB encaminado a la detección de PI y su eliminación de rebaño con la finalidad de poder controlar la enfermedad.

Figura 2. Modelo de diagnóstico de DVB para detección de animales PI y control de la enfermedad. Debe considerarse que cada hato es un universo diferente y que los planes se deben adaptar dependiendo de cada predio. Además, se deben tener en cuenta si se vacuna o no y con qué tipo de vacuna lo hacen. Este ejemplo se basa en el uso de un ELISA para detección de proteína P80.

Estrategias de diagnóstico para detección del virus de diarrea viral bovina VDVB 2

Referencias.

  • Ramírez R., et al. Prevalencia del Virus de la diarrea viral bovina y su asociación con otros cuadros patológicos en ganado en corral de engorda. Revista Veterinaria México, 43 (3) 2012.
  • Terán F., et al. Frecuencia de diarrea viral bovina en el municipio de Catemaco, Veracruz. Universidad Veracruzana. Publicado en I Congreso AMEBV 2016.
  • Rosete F., et al. Prevalencia de anticuerpos contra diarrea viral bovina en vacas no vacunadas en los estados de Puebla, Tabasco y Veracruz. Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias Vol. 9 Núm, 3. Jun. 2018
  • Rosete F., et al. Control zoosanitario de la diarrea viral bovina, rinotraqueitis infecciosa bovina, neosporosis y leptospirosis en bovinos en pastoreo en el trópico húmedo de Tabasco. Huimanguillo Tabasco, México. 2014. Folleto técnico INIFAP Núm. 76, ISBN: 978-607-37-0340-6
  • Zavaleta J., et al. Prevalencia de rinotraqueitis infecciosa bovina y diarrea viral bovina en hembras en tres épocas del año en la zona centro de Veracruz. Revista Electrónica Nova Scientia, No. 16, Vol. 8 (1), 2016 ISSN 2007-0705 pp: 213-227
  • Barajas R. Aplicación de la técnica inmunoenzimática de ELISA para estudios epidemiológicos de enfermedades de ganado bovino en el trópico de México. UNAM. Ciencia Veterinaria 8-1998.
  • Ojeda C., et al. Seroprevalencia de enfermedades que afectan la reproducción de bovinos para leche con énfasis en neosporosis. Artículo científico. Ecosistemas y Recursos Agropecuarios Vol 3, No. 8. 2016
  • Salmerón G. Diarrea viral bovina. Monografía para titulación de MVZ. Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro. Torreón,
    Coahuila. México. 2012.
  • Serrano G. Diarrea viral bovina (DVB). Estrategias de Diagnóstico. Entorno Ganadero No. 66. BM Editores. México 2014.
  • Diarrea viral bovina prevención, signos y erradicación. INIFAP. (http://www.gob.mx) visitada el 14 de Agosto 2019.

Artículo publicado en Entorno Ganadero Octubre- Noviembre 2019

 

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